激素 6 项（卵泡刺激素 FSH、黄体生成素 LH、雌二醇 E2、孕酮 PROG、睾酮 TEST、催乳素 PRL）是反映人体生殖内分泌系统功能的核心指标，广泛应用于妇科疾病诊断、生殖健康评估、内分泌紊乱筛查等场景。
（一）卵泡刺激素（FSH）
生理功能：由垂体前叶分泌，主要作用是促进卵巢卵泡发育成熟（女性）、刺激睾丸生精小管生精（男性），是调节生殖细胞生成的关键激素；
（二）黄体生成素（LH）
生理功能：与 FSH 协同作用，女性中促进排卵、维持黄体功能（分泌孕酮），男性中刺激睾丸间质细胞分泌睾酮；
（三）雌二醇（E2）
生理功能：主要由卵巢颗粒细胞（女性）、肾上腺皮质（男性）分泌，女性中调节子宫内膜增殖、促进乳腺发育、维持女性第二性征；男性中参与精子生成、维持骨密度；
展开剩余83%（四）孕酮（PROG）
生理功能：主要由卵巢黄体（女性）分泌，作用是维持子宫内膜分泌期状态、支持胚胎着床与妊娠维持；男性中由肾上腺皮质和睾丸分泌，参与睾酮代谢调节；
（五）睾酮（TEST）
生理功能：主要由睾丸间质细胞（男性）、卵巢与肾上腺皮质（女性）分泌，男性中维持精子生成、促进肌肉发育、维持男性第二性征；女性中参与卵泡发育、调节性欲；
（六）催乳素（PRL）
生理功能：由垂体前叶催乳素细胞分泌，主要作用是促进乳腺发育与乳汁分泌，同时抑制 FSH、LH 分泌，调节生殖功能；
茁彩生物采用的酶联免疫竞争法，是基于 “抗原竞争结合抗体” 的免疫反应原理，通过酶促显色信号定量分析激素浓度，核心原理与操作设计如下：
竞争结合机制：检测体系中存在两种抗原 —— 待检激素（样本中的 FSH/LH/E2 等）与酶标记激素（已知浓度，将激素与辣根过氧化物酶 HRP 或碱性磷酸酶 AP 偶联），二者竞争结合固相载体（酶标板）上的特异性抗体；
信号与浓度的负相关关系：样本中待检激素浓度越高，与抗体结合的量越多，酶标记激素结合量越少，后续酶促反应产生的显色信号（吸光度值）越弱；反之，待检激素浓度越低，显色信号越强；
定量依据：通过绘制 “标准品浓度 - 吸光度值” 的标准曲线，将样本的吸光度值代入曲线，计算得出待检激素的准确浓度。
试剂组成（茁彩生物试剂盒）
固相载体：包被有激素特异性单克隆抗体的 96 孔酶标板，抗体与激素的结合特异性＞99%，交叉反应率＜1%（如 FSH 抗体与 LH 的交叉反应率＜0.5%）； 酶标记物：HRP 标记的激素抗原（如 HRP-FSH、HRP-TEST），标记效率＞0.8（即每分子激素偶联≥0.8 个 HRP 分子），4℃储存有效期 12 个月； 标准品：已知浓度的激素标准品，浓度梯度通常为 0、0.1、0.5、2、10、50IU/L（或 ng/mL、pg/mL，根据激素类型调整），采用校准品溯源至国际标准物质（如 WHO 标准品）； 底物溶液：HRP 对应的底物为四甲基联苯胺（TMB），在 HRP 催化下呈蓝色，加入终止液（硫酸）后变为黄色，最大吸收波长为 450nm； 洗涤液：含 0.05% 吐温 - 20 的磷酸盐缓冲液（PBS，pH7.4），用于去除未结合的抗原与酶标记物，减少非特异性结合； 终止液：2mol/L 硫酸溶液，用于终止酶促反应，稳定显色信号。检测操作流程（茁彩生物标准化步骤）
（一）样本采集与预处理
样本类型：优先选用血清样本（静脉采血 3-5mL，室温静置 30 分钟后离心，3000rpm×10 分钟，取上层血清）；也可检测血浆样本（需使用 EDTA 或肝素抗凝管，避免溶血，溶血会导致 PRL、TEST 检测结果偏高）； 样本储存：新鲜样本需在 24 小时内检测；若需保存，2-8℃可保存 72 小时，-20℃可保存 3 个月（避免反复冻融，冻融次数不超过 2 次）； 样本稀释：对于浓度过高的样本（如绝经后 FSH、高催乳素血症患者 PRL），需用试剂盒配套的稀释液按 1:10 或 1:100 稀释，确保检测结果落在标准曲线线性范围内（标准曲线线性相关系数 R²≥0.99）。（二）实验操作步骤（以 96 孔板为例）
试剂平衡：将酶标板、酶标记物、标准品从冷藏环境（2-8℃）取出，室温（20-25℃）平衡 30 分钟，避免试剂温度过低导致反应不均； 加样：空白孔：加入 50μL 稀释液，不加标准品与样本；
标准品孔：依次加入 50μL 不同浓度的标准品（0、0.1、0.5、2、10、50IU/L 等）；
样本孔：加入 50μL 预处理后的样本；
3.加酶标记物：每孔加入 50μL 酶标记激素（HRP - 激素），轻轻振荡酶标板（300rpm×30 秒），确保液体充分混合；
4.孵育：将酶标板密封，置于 37℃恒温孵育箱中孵育 60 分钟（孵育时间误差≤5 分钟，温度波动≤±0.5℃，否则影响结合效率）；
5.洗涤：弃去孔内液体，每孔加入 300μL 洗涤液，静置 30 秒后弃去，重复洗涤 5 次，最后一次洗涤后将酶标板倒置在吸水纸上拍干（避免洗涤不充分导致非特异性显色）；
6.显色：每孔加入 50μL 底物溶液（TMB），避光室温孵育 15 分钟（避光孵育可防止底物分解，确保显色稳定）；
7.终止：每孔加入 50μL 终止液，轻轻振荡混匀，10 分钟内测定吸光度值（终止后颜色稳定 10 分钟，超过时间会导致吸光度下降）；
8.读数：使用酶标仪在 450nm 波长下测定各孔吸光度值（参考波长 630nm，用于校正背景信号），记录数据。
（三）标准曲线绘制与浓度计算
标准曲线绘制：以标准品浓度为横坐标（X 轴，对数坐标），对应的吸光度值为纵坐标（Y 轴，线性坐标），采用四参数逻辑斯蒂回归（4-PL）拟合标准曲线，拟合公式为：Y = (A - D) / [1 + (X/C)^B] + D
式中：A 为最大吸光度值（标准品浓度为 0 时），D 为最小吸光度值（标准品浓度无限大时），B 为曲线斜率，C 为半数抑制浓度（IC50），标准曲线的相关系数 R² 需≥0.99；
样本浓度计算：将样本的吸光度值代入标准曲线，计算得出样本中待检激素的浓度，若样本已稀释，需乘以稀释倍数得到最终浓度（如稀释 10 倍的样本，计算浓度 ×10 为实际浓度）。发布于：上海市网眼查提示：文章来自网络，不代表本站观点。
